菌落总数的计算是微生物学中一个重要的实验技术，主要用于评估食品、水或其它样品的卫生质量。以下是计算菌落总数的详细步骤和注意事项：
菌落总数的定义
菌落总数是指在特定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等），每克或每毫升检样中所生长出的细菌菌落总数。它通常用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量 。
计算方法（平板计数法）
- 样品准备：取一定量的细菌悬液，制备几个不同的10倍递增稀释液。
- 接种：从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中，并与营养琼脂培养基混合。
- 培养：在一定温度下培养一定时间（通常为48小时）。
- 计数：
- 使用肉眼观察，必要时借助放大镜或菌落计数器。
- 选择菌落数在30CFU（菌落形成单位）到300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板进行计数。
- 记录稀释倍数和相应的菌落数量。
- 若只有一个稀释度平板上的菌落数在30~300CFU之间，计算两个平板菌落数的平均值，再乘以相应稀释倍数，作为每克或每毫升样品中菌落总数的结果。
- 若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为“多不可计”，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
- 若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
- 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算 。
注意事项
- 菌落总数通常以CFU/ml或CFU/g报告。
- 需要注意的是，菌落总数并不代表实际中的所有细菌总数，因为它不能区分细菌的种类，也不包括厌氧菌或微需氧菌、有特殊营养要求的细菌 。
通过以上步骤，可以有效地计算出样品中的菌落总数，从而评估样品的卫生质量。
